Diagomics propose des anticorps  de Zytomed Systems, MUbio, Quartett destinés  à la recherche en biologie cellulaire et la recherche biomédicale.  Ils sont utilisables dans des techniques de laboratoires telles que l'IHC, IF, FC, WB, ELISA, lP,.... sans oublier les coffrets pour la détection de l’apoptose (Annexin V). Ces anticorps primaires peuvent fonctionner chez plusieurs espèces  (homme, rat, souris, lapin, porc, chien, xenope...).

En savoir plus sur SNC, Protéines nucléaires, Protéines du cytosquelette, Molécules d'adhésion, Protéines membranaires, Protéines de la matrice extracellulaire, Cycle cellulaire, Protéines du bactériophage

MARQUEURS DU SYSTEME NERVEUX CENTRAL

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* GFAP
* Synemin
* Nestine
* Vimentine

PROTEINES NUCLEAIRES

Une grande partie du noyau de la cellule est structurée par la lamina nucléaire. Les lamines y forment un réseau dense de filaments sous jacent à la membrane nucléaire.
Deux types de lamines nucléaires sont décrites: les lamines de type A et les lamines de types B. Les lamines de type A comprennent les lamines A, C et Ade110  toutes dérivées du même gène par épissage alternatif. Les lamines de type B correspondent à deux protéines, la lamine  B1 et la lamine B2,  codées chacune par un gène distinct.
Les lamines nucléaires forment une sous-classe unique de la famille des protéines des filaments intermédiaires. Elles partagent, avec les autres protéines des filaments intermédiaires, la structure moléculaire des molécules fibreuses :  une tête globulaire amino-terminale, une tige centrale faite d'alpha-hélices et un domaine globulaire carboxyterminal.

Beaucoup des caractéristiques biochimiques et moléculaires des lamines ont été étudiées, mais leurs fonctions restent encore peu démystifiées. Une fonction majeure serait le maintient de l'intégrité structurale du noyau.
En plus des interactions avec la membrane nucléaire et avec d'autres filaments intermédiaires, les lamines interagissent avec la chromatine nucléaire. La chromatine eucaryotique est organisée en boucles qui sont attachées à la matrice nucléaire. On pense que cette organisation contribue à la compaction de la chromatine et à la régulation de l’expression des gènes. Les lamines, en tant que partie de la matrice nucléaire, pourraient être impliquées dans ces processus puisque les sites de liaison à la chromatine ont été détectés dans les lamines de type A et B.

* Lamines

PROTEINES DU CYTOSQUELETTE

Le cytosquelette de cellules eucaryotes est constitué de trois réseaux fibrillaires majeurs : les microtubules, les microfilaments et les filaments intermédiaires. Ces différentes structures protéiques fibrillaires, qui jouent un rôle tant dans la stabilité que dans la mobilité des cellules, peuvent être distinguées sur la base de leurs caractéristiques morphologiques et leurs propriétés cellulaires.

Double-immunofluorescence : Marquage des
cytokératines (rouge) et neurofilaments (vert)
de culture de cellules d’un cancer du poumon hétérogène

Type de filaments	Diamètre de Filaments	Constitution des Protéines	Type  de Tissue / Cellule
Microtubules	25 nm	Alpha et Beta Tubuline	La plupart des types cellulaires
Filaments intermédiaires	10 nm	Cytokératines Vimentine Desmine GFAP Neurofilament Lamines	Epithelium Cellules mésenchymateuses Muscle Astrocytes Cellules nerveuses La plupart des types cellulaires
Microfilaments	5 nm	Alpha, Beta et Gamma Actine Smootheline	Muscle Muscle lisse La plupart des types cellulaires

Tandis que pour les microtubules et les microfilaments sont impliqués dans divers processus cellulaires tels la division, la locomotion, la polarité, l'ancrage et les courants cytoplasmiques,
la fonction des filaments intermédiaires n'a pas encore été élucidée bien qu'un rôle dans la maintenance de l’intégrité cellulaire soit devenue probable.
Les anticorps spécifiques des protéines du cytosquelette sont largement utilisés en biologie cellulaire.
Ceux, spécifiques des filaments intermédiaires, permettent de surcroit la différenciation des classes majeures de tissus et leurs malignités et sont donc devenus un outil important en pathologie des tumeurs.

* Cytokeratines
* Vimentine et Desmine
* GFAP (GLIAL FIBRILLARY ACIDIC PROTEIN)
* Neurofilaments
* Lamines
* Actine
* Smootheline

MOLECULES d’ADHESION CELLULAIRE

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Plusieurs grandes familles de molécules d’adhésion cellulaire sont distinguées. Celles-ci incluent les cadhérines et les molécules d’adhésion neuronales (N-CAMs) qui jouent un rôle crucial dans la reconnaissance cellulaire et l’adhésion, tandis que les intégrines sont impliquées dans l’adhésion des cellules à la matrice extracellulaire.

Les cadhérines constituent une famille de protéines différentiellement exprimées dans divers tissus. L’une des mieux caractérisées est la E-cadhérine, qui est exprimée dans les tissus épithéliaux. Il a été montré qu’elle joue un rôle crucial dans le processus métastatique des cellules tumorales. Les N-CAMs (molécules d’adhésion des cellules neuronales) existent en au moins trois formes de glycoprotéines membranaires et sont exprimées par une variété de tissus incluant la plupart des cellules nerveuses.
Au final, les intégrines forment une grande famille de glycoprotéines transmembranaires glycosylées qui agissent comme dimers de sous unités alpha et beta dans la connexion du cytosquelette à la matrice extracellulaire.

* NCAM
* Cadhérines
* Caténines
* Intégrines
* Plakophylines
* Sélectines

PROTEINES MEMBRANAIRES

Le système endomembranaire centré sur le réticulum endoplasmique multifonctionnel est un constituant majeur du système de sécrétion cellulaire. Des protéines sécrétoires nouvellement synthétisées et une variété des protéines résidentes des voies sécrétoires participent au réticulum endoplasmique granuleux. Il en résulte que les protéines sont aiguillées  sélectivement vers les différents organelles incluant l'appareil Golgi, les endosomes, les lysosomes et les vésicules sécrétoires.

Plusieurs classes de protéines régulent les différentes étapes du transport des protéines et des lipides à travers les structures membranaires. MUbio BV fournit des anticorps spécifiques d’une nouvelle famille de protéines associées au réticulum, les reticulons, qui montrent une distribution tissulaire spécifique.

Il a été démontré que les protéines membranaires mitochondriales sont impliquées dans plusieurs processus cellulaires comme la régulation de l’apoptose et le métabolisme énergétique. Les anticorps anti-cardiotine, qui réagissent avec certains complexes protéiques membranaires mitochondriaux, ont été démontrés être des indicateurs précoces des changements du myocarde induits par l’ischémie.

* Anticorps anti-Reticulon
* Anticorps anti-Cardiotine

PROTEINES DE LA MATRICE EXTRA-CELLULAIRE

La matrice extracellulaire est un réseau complexe de (glyco) protéines sécrétées entre les cellules des tissus. Les proportions des différents types de macromolécules et la manière dont elles sont organisées en matrice extracellulaire varient selon les  tissus.

Par exemple, les tissus connectifs ont de vastes matrices extracellulaires comportant des polymères fibreux et particulièrement le collagène. Par contraste, la matrice extracellulaire des tissus épithéliaux se limite à une couche mince appelée lamina basal qui se localise à la base du feuillet des cellules épithéliales. Les cellules situées dans la matrice extracellulaire produisent les constituants de la matrice et en contrôle l'organisation. Les composants principaux de la matrice extracellulaire sont les protéoglycans (p.ex. l’aggrecan, le perlecan et le syndecan) et les protéines fibreuses (p. ex. le collagène, l’élastine, la fibronectine et la laminine). La matrice extracellulaire en sus du rôle structural de soutien des cellules joue aussi un rôle dans la régulation de processus tels la prolifération, la différentiation, l’adhésion et la locomotion des cellules.

* Protéines de la Matrice extracellulaire

CYCLE CELLULAIRE

Le cycle cellulaire d’une cellule eucaryote comporte différentes étapes, dont deux sont facilement identifiables. La première correspond à la métaphase (phase M), quand la cellule se divise en deux cellules filles identiques et où la condensation des chromosomes et la formation des fuseaux mitotiques sont visibles au microscope. La deuxième est la phase de synthèse (phase S),  quand l'ADN d'une cellule est répliqué, processus qui peut être détecté en utilisant des techniques biochimiques. Entre la phase M et la phase S,  deux phases surviennent: la phase G1, entre mitose et le début de la réplication de l'ADN, et la phase G2, entre achèvement de la réplication de l’d'ADN et le début de la mitose. A partir de la phase G1, une cellule peut quitter le cycle cellulaire et entrer en G0, une phase dormante au niveau réplication. La régulation du cycle cellulaire survient principalement à trois étapes qui gouvernent la transition de G0 à G1, de G1 à S et de G2 à M.

* Protéines du cycle cellulaire

PROTEINES DU MANTEAU DU BACTERIOPHAGE M13

L’expression de répertoires de fragments V d’anticorps à la surface de phages filamenteux est une nouvelle méthode pour dériver des réactifs immunologiques spécifiques [2].

Ces anticorps recombinants offrent de nombreux avantages par rapport aux monoclonaux de souris parmi lesquels une meilleure clairance du sang, la possibilité de sélectioner des anticorps issus de librairies humaines et la facilité de manipulation des fragments.
L’approche de l’expression par les phages facilite donc la sélection de fragments d’intérêt thérapeutique ou pour la recherche.
Les anticorps contre les protéines du manteau des phages filamenteux sont des outils indispensables pour la détection et la sélection des fragments d’anticorps ou de séquences peptidiques exprimés sur des phages.

Anticorps monoclonaux pour le screening de librairies d’anticorps sur phages.

Clone	Spécificité	Application	Cross réactivité	Ig
RL-ph1	g8p-protein Filamentous phage coat protein g8p	F, WB	phage	Souris IgG2b
RL-ph2	g8p-protein Filamentous phage coat protein g8p	F, WB	phage	Souris IgG2a
RL-ph3	g8p-protein Filamentous phage coat protein g8p	WB	phage	Souris IgM

References:
1.  McCafferty J, Griffiths AD, Winter G, Chiswell DJ. Phage antibodies: filamentous phage displaying antibody variable domains. Nature 348: 552-554 (1990).
2.  Clackson T, Hoogenboom HR, Griffiths AD, Winter G. Making antibody fragments using phage display libraries. Nature 352: 624-628 (1991)
3.  Meulemans EV, Slobbe R, Wasterval P, Ramaekers FCS, Van Eys GJJM. Selection of phage-displayed antibodies specific for a cytoskeletal antigen by competitive elution with a monoclonal antibody. J Mol. Biol. 244: 353-360 (1994).
4.  Meulemans EV, Nieland LJ, Debie WH, Ramaekers FCS, Van Eys GJJM. Phage displayed antibodies specific for a cytoskeletal antigen. Selection by competitive elution with a monoclonal antibody. Hum. Antibod. Hybridomas 6: 113-118 (1995).

 

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